siRNA 是基因分析和代謝疾病治療的有力工具。 siRNA 可以在非變性雙鏈條件下使用 HPLC 分析,以控制雙鏈體型態和單鏈的總量。 此外,可以在變性條件下研究非雜交的單鏈 RNA。 在這兩種情況下,IP-RP 和 AEX 都是常用的方法。
在本應用文章中,展示了在變性和非變性條件下對雙鏈 siRNA 的分析。 生物惰性層析管柱 YMC-Accura Triart Bio C18 UHPLC 用於 IP-RP 模式,而離子交換樹脂 BioPro IEX QF 層析管柱用於 AEX 模式。
siRNA 是基因分析和代謝疾病治療的有力工具。 siRNA 可以在非變性雙鏈條件下使用 HPLC 分析,以控制雙鏈體型態和單鏈的總量。 此外,可以在變性條件下研究非雜交的單鏈 RNA。 在這兩種情況下,IP-RP 和 AEX 都是常用的方法。
在本應用文章中,展示了在變性和非變性條件下對雙鏈 siRNA 的分析。 生物惰性層析管柱 YMC-Accura Triart Bio C18 UHPLC 用於 IP-RP 模式,而離子交換樹脂 BioPro IEX QF 層析管柱用於 AEX 模式。
這篇範例說明使用IP-RP UHPLC進行複雜oligonucleotide樣品純化前的定性與定量實驗。
此應用資料使用YMC Triart C18 UHPLC於IP-RP模式進行crude oligonucleotide的分離。
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最近發表的一篇論文指南總結“如何建立穩定的 HIC 方法”。 論文重點介紹了完整蛋白質和 mAb 的分析。Eeltink 教授的小組(布魯塞爾大學/VUB)提出了有用且詳細的方面,特別是對於:
–如何設置和維護系統以實現穩定的性能
–樣品製備條件對樣品穿透的影響
–從 3 個不同的層析管柱批次中獲得的 5 隻不同層析管柱的實驗再現性
分析的樣品是完整蛋白質(intact proteins)或單株抗體(monoclonal antibodies)的混合物。 選擇的層析管柱是 YMC 的 BioPro HIC HT層析管柱。
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