月份: <span>2025 年 1 月</span>

離子配對反相液相層析（Ion Pair Reversed Phase, IP-RP）是目前分析寡核苷酸（oligonucleotides）的黃金標準。

然而，常用的含氟醇類離子配對試劑（例如 1,1,1,3,3,3-六氟-2-丙醇，HFIP）在成本與環境影響上都存在顧慮，因此極需替代方案。

本應用根據 Hayashi 與 Sun 的研究 [1]，
展示了一種不使用離子配對試劑的反相層析（non-IP-RP）方法，
以 碳酸氫銨（ammonium bicarbonate） 作為移動相添加劑，用於治療性寡核苷酸的分析。

研究顯示，碳酸氫銨 對質譜（MS）靈敏度具有正面影響。
在加熱條件下（約 60 °C），碳酸氫銨會分解為氨（NH₃）與二氧化碳（CO₂），
後者在 ESI（電灑游離）微滴中形成氣泡 [2]。
同時，氨與銨離子間的平衡（NH₃ ⇌ NH₄⁺ + H⁺）也可能是關鍵因素：
在 ESI 微滴中，氨氣揮發後留下的質子（H⁺）能與分析物形成加合離子（adducts），增強訊號。

因此，碳酸氫銨 搭配 具生物惰性塗層的 YMC Accura Triart C18 管柱，成為質譜高靈敏檢測的理想組合。

該方法的適用性已通過多種市售、含化學修飾的寡核苷酸樣品驗證，
其中包括 6 種反義寡核苷酸（ASO）、3 種 siRNA 以及 4 種類似物（analogues）。

此外，該方法在分析重構血漿樣品中的 lumasiran（Lum, Oxlumo®） 時，
也證實其可應用於生物分析（bioanalysis），展現了高靈敏度與廣泛適用性。

References:
[1] Yoshiharu Hayashi and Yuchen Sun, Journal of the American Society for Mass Spectrometry Article ASAP, DOI: 10.1021/jasms.4c00270

[2] House, J. E. Decomposition of ammonium carbonate and ammonium bicarbonate and proton affinities of the anions.
Inorganic and Nuclear Chemistry Letters 1980, 16 (4), 185-187.

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全氟與多氟烷基物質 (PFAS)是 持久性環境污染物，以其極長壽命與高遷移性著稱。

其穩定性導致其在地下水和土壤中累積，並已證實對健康造成危害。

為了減少環境汙染，目前已有多種 PFAS 化合物被納入管制，
例如 全氟辛酸（PFOA）、全氟己烷磺酸（PFHxS），以及 長鏈全氟烷基羧酸（C9–C14） 等。

本技術說明介紹了一種利用 YMC-Triart C18 高效液相層析管柱
進行 PFAS 化合物 鑑定與定量分析 的方法。

此管柱採用強韌的 混合型矽膠顆粒（hybrid silica particle） 製成，
在結合質譜分析（MS）時，可提供 更佳的異構物分離能力 與 更高的分析性能。

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將離子交換層析(IEX)直接與質譜(MS)聯用，是一項能夠簡化分析流程並減少因冗長的分離步驟所造成偽影(Artefacts)的革命性突破。

雖然使用揮發性緩衝液與鹽類使得 IEX 與 MS 的耦合成為可能，
但離子交換色譜法(IEX) 分離中常用的高鹽濃度，仍對質譜(MS)的相容性構成挑戰。

為克服此問題，可以採用耐高鹽度的 奈米電噴灑游離源 (nano-electrospray ionisation, nanoESI)，
並可搭配如流量分流器 (flow splitter)等系統化配置，將流量降至 sub-µL/min。

然而，若進一步採用 內徑 (ID)更小、且具生物惰性塗層的 IEX 管柱，
則能獲得更顯著的效能提升。
這樣的設定可帶來 更銳利的峰形、更高的分離解析度，以及最佳的回收率——
甚至在第一次進樣時就能達成。

本應用報告證明使用 內徑 2.1 mm、具生物惰性塗層的 YMC Accura BioPro IEX SF 管柱，
在與質譜 (MS) 耦合時，相較於傳統 內徑 4.6 mm 的 PEEK 管柱，能夠提供更優異的分離解析度。

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