應用資料：無需使用離子配對試劑的治療性寡核苷酸反相質譜分析（RP-MS analysis）

離子配對反相液相層析（Ion Pair Reversed Phase, IP-RP）是目前分析寡核苷酸（oligonucleotides）的黃金標準。

然而，常用的含氟醇類離子配對試劑（例如 1,1,1,3,3,3-六氟-2-丙醇，HFIP）在成本與環境影響上都存在顧慮，因此極需替代方案。

本應用根據 Hayashi 與 Sun 的研究 [1]，
展示了一種不使用離子配對試劑的反相層析（non-IP-RP）方法，
以 碳酸氫銨（ammonium bicarbonate） 作為移動相添加劑，用於治療性寡核苷酸的分析。

研究顯示，碳酸氫銨 對質譜（MS）靈敏度具有正面影響。
在加熱條件下（約 60 °C），碳酸氫銨會分解為氨（NH₃）與二氧化碳（CO₂），
後者在 ESI（電灑游離）微滴中形成氣泡 [2]。
同時，氨與銨離子間的平衡（NH₃ ⇌ NH₄⁺ + H⁺）也可能是關鍵因素：
在 ESI 微滴中，氨氣揮發後留下的質子（H⁺）能與分析物形成加合離子（adducts），增強訊號。

因此，碳酸氫銨 搭配 具生物惰性塗層的 YMC Accura Triart C18 管柱，成為質譜高靈敏檢測的理想組合。

該方法的適用性已通過多種市售、含化學修飾的寡核苷酸樣品驗證，
其中包括 6 種反義寡核苷酸（ASO）、3 種 siRNA 以及 4 種類似物（analogues）。

此外，該方法在分析重構血漿樣品中的 lumasiran（Lum, Oxlumo®） 時，
也證實其可應用於生物分析（bioanalysis），展現了高靈敏度與廣泛適用性。

References:
[1] Yoshiharu Hayashi and Yuchen Sun, Journal of the American Society for Mass Spectrometry Article ASAP, DOI: 10.1021/jasms.4c00270

[2] House, J. E. Decomposition of ammonium carbonate and ammonium bicarbonate and proton affinities of the anions.
Inorganic and Nuclear Chemistry Letters 1980, 16 (4), 185-187.

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