White paper: 使用陰離子交換(Anion exchange)與離子對逆相層析(IP-RP)分析與純化oligonicleotides指引

本白皮書適合所有處理寡核苷酸分析和/或純化的層析工作者。主要使用陰離子交換色譜 (anion exchange chromatography, AEX) 和離子對逆相層析 (ion-pair reversed phase chromatography, IP-RP)。 對於這兩種模式,主要方向是選擇合適的固定相和移動相以及最佳溫度。 當然,也要考量到大規模製程的需求。 在本白皮書中,我們將從以下幾個觀點切入:

1. 治療性寡核苷酸簡介(作者:瓦倫蒂娜·達特里 (Valentina D’Atri) 博士,日內瓦大學)

2.治療性寡核苷酸的液相層析分離模式

3.陰離子交換層析

4.離子對逆相層析

5.進樣量和放大的重要考慮因素

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應用資料:使用IP-RP與AEX分離模式分析變性與未變性的siRNA

siRNA 是基因分析和代謝疾病治療的有力工具。 siRNA 可以在非變性雙鏈條件下使用 HPLC 分析,以控制雙鏈體型態和單鏈的總量。 此外,可以在變性條件下研究非雜交的單鏈 RNA。 在這兩種情況下,IP-RP 和 AEX 都是常用的方法。

在本應用文章中,展示了在變性和非變性條件下對雙鏈 siRNA 的分析。 生物惰性層析管柱 YMC-Accura Triart Bio C18 UHPLC 用於 IP-RP 模式,而離子交換樹脂 BioPro IEX QF 層析管柱用於 AEX 模式。

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技術說明:使用HIC 方法實現穩定分析蛋白質和 mAb 的基本指南

最近發表的一篇論文指南總結“如何建立穩定的 HIC 方法”。 論文重點介紹了完整蛋白質和 mAb 的分析。Eeltink 教授的小組(布魯塞爾大學/VUB)提出了有用且詳細的方面,特別是對於:

如何設置和維護系統以實現穩定的性能
樣品製備條件對樣品穿透的影響
從 3 個不同的層析管柱批次中獲得的 5 隻不同層析管柱的實驗再現性

分析的樣品是完整蛋白質(intact proteins)或單株抗體(monoclonal antibodies)的混合物。 選擇的層析管柱是 YMC 的 BioPro HIC HT層析管柱
完整文獻可免費下載!

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