年份: <span>2022 年</span>

New Application Note: Purification of Oligonucleotides via IP-RP

寡核苷酸的製備級分離純化可能是一個巨大的挑戰。 IP-RP 的條件使用非常有利於開發有效的分離方法，但需要特殊的技術。 這份新的應用說明了離子對試劑通過 IP-RP 分離寡核苷酸的原理和優勢。

對於使用 IP-RP 方法純化寡核苷酸，YMC 提供了幾個非常適合的固定相。 YMC-Triart 材料提供額外的優勢，例如延長使用壽命和擴大可使用的 pH 範圍。

Rapid Analysis of Tobacco Smoke Biomarkers

使用UHPLC 方法於分析五種生物標誌物：尼古丁(nicotine)和可替寧(cotinine)，以及 NNAL 以及 8-OhdG 和 m7Gua。

RP 和 HILIC 均可實現高分辨度峰型和快速分離。
尼古丁檢測中同時測定了代謝物可替寧。這裡的挑戰是，需在很短的時間內完成檢測。
NNAL，一種肺部致癌物 NNK 的分解產物，也適用同一分析條件。此外，抽菸時人類細胞也承受氧化壓力，因此典型的生物標誌物 8-OhdG和 m7Gua 也被一起評估。

請於在此處下載新的應用說明資料！

有關 YMC-Triart 層析管柱的更多消息，請參閱 YMC-Triart 目錄或網頁。

Column Packing Guide

將高性能固定相材料快速、可靠地填充進層析管柱是生產純化過程至關重要的步驟．
我們提供了精簡說明海報，針對不同的膠體、管柱類型進行說明，包括重要的注意事項和計算說明。
包含以下內容：

1.Packing Silica and Hybrid-Silica Stationary Phases into DAC Columns(請來信索取)
2.Packing Silica and Hybrid-Silica Stationary Phases into Glass Columns(請來信索取)
3.Packing of BioPro IEX Resins into Glass Columns(請來信索取)

如有純化樣品上的問題與需求或支援現場問題處理，歡迎與我們聯繫，我們將派專員與您討論。

HPLC Analysis of Phosphoramidites using RP or NP conditions

亞磷酰胺是寡核苷酸、核苷酸短片段和類似物化學合成的重要組成部分，在合成過程中可能會出現錯誤，因此需要密切監測亞磷酰胺的純度。

在本應用簡報中，說明如何使用兩種不同的分離模式分析亞磷酰胺：反相 (RP) 和正相 (NP) 管柱層析。

在此處下載相關應用資料，了解 YMC-Triart 層析管柱如何使用 RP 或 NP 分離模式得到出色的結果。

New chiral RP Application Note: DL-norgestrel / levonorgestrel

孕激素 DL-norgestrel的消旋體已上市幾年了，我們開發了針對levonorgestrel的分離。儘管levonorgestrel可以通過不對稱合成製備，但將此兩個對掌異構物的分離和/或定量仍非常重要。

此份新的應用說明如何在逆相模式下使用 YMC 的immobilised CHIRAL ART Cellulose-SC 層析管柱可靠地分離對掌異構物，且不需要非常嚴格的沖提液或樣品溶劑的要求。

有關 YMC CHIRAL ART polysaccharide層析管柱介紹，請至我們的網頁連結或下載目錄參考。

Fast HILIC analysis of hydrophilic dipeptides

HILIC 分離的沖提順序與 RP 模式完全相反，使其成為分析親水性化合物的理想選擇。由於這些化合物在 HILIC 層析管柱上沖提較晚，因此這種分離模式非常適合分析親水性生物分子。

使用 YMC-Triart SIL 層析管柱可以分離四種不同的親水性雙肽，如此份新應用說明中所示。L-Carnosine和 L-anserine可在哺乳動物的肌肉和腦組織中找到。Gly-Gly 用於胜肽合成而 Gly-Asp 常見於代謝物。

YMC-Triart SIL 層析管柱對所有雙肽均表現出出色的分離度，即使對於結構相似的化合物 L-Carnosine和 L-anserine也是如此。在此處下載應用說明副本，了解如何在 4 分鐘內完成 HILIC 分離！

進行胜肽與蛋白質HPLC分析方法最佳化時，可從以下因素切入考量:

層析管柱	官能團與相對應的管柱膠體孔徑大小 ⇒ 根據胜肽和蛋白質的分子量大小和疏水性來選擇最適合之組合。 一般來說，大分子樣品使用大孔徑和低表面疏水性的層析管柱。
移動相	梯度首選0.1% TFA/acetonitrile條件 ⇒ 如果是有各種離子特性之混合物樣品，可調整 1) TFA濃度, 2) 酸種類 以及/或pH ⇒ 調整梯度條件 較大之蛋白質使用2-propanol可能有分離效果
溫度	溫度對改變分離選擇性或改善峰形有效果。但是，可用的溫度範圍受到層析管柱耐用性之限制。 （強酸性條件+加熱會加速官能團的降解=縮短滯留時間和/或增加不利於膠體和樣品之間的二次作用力）

<<如何選擇逆相層析管柱>>  <<Bioseparation Catalog>>

比較管柱不同孔徑與不同官能基差異對分離效果的影響

我們比較了分子量介於 4,300~17,000的蛋白質與胜肽樣品對於不同孔徑與不同官能基分離特性的比較。由以下圖譜觀察可以發現，適合這個分子量範圍的管柱為C8, 200 Å。若孔徑或是官能基選擇未進行最佳化，我們會觀察到較寬的峰型以及較差的解析度。使用適合樣品的管柱可以得到漂亮的峰型以及優越的分離結果。

1.Cytochrome c           (MW 12,400)
2.Insulin (Bovine)          (MW 5,700)
3.Amyloid β-protein      (MW 4,300)
4.Lysozyme                  (MW 14,300)
5.α-Lactalbumin           (MW 14,100)
6.Myoglobin                 (MW 17,000)

Column	5 μm, 150 X 4.6 mmI.D.
Eluent	A) water/TFA (100/0.1) B) acetonitrile/TFA (100/0.1) 25-60%B (0-20 min)
Flow rate	1.0 mL/min
Temperature	37°C
Detection	UV at 220 nm

管柱溫度以及移動相的影響 (抗菌胜肽分離最佳化)

結構 (抗菌胜肽) 

管柱溫度影響

改變管柱溫度會改變選擇性並改善峰形。高耐用性層析管柱 Triart可提供更廣泛的使用溫度範圍。 溫度控制可用作方法最佳化的工具。

移動相酸類型、濃度以及梯度條件的影響 (於70°C)

我們也可藉由改變酸類型和/或濃度來改變選擇性。 當化合物的離子特性差異很大時，這是一個很有效的分離策略。

添加2-propanol於移動相中

2-propanol添加於移動相中並梯度最佳化。改善了peak 1及peak 2的解析度並維持一樣的分離時間。

應用資料

Application of amino acids/peptides/proteins